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一步法RT-PCR反轉試劑盒50次

一步法RT-PCR試劑盒是為從總RNA或mRNA中特異性的反轉和擴增目的RNA而設計的。該系統在一種優化反應體系中共用MMLV反轉錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶的預混液,能夠檢測長達4.0 kb的RNA目的片段??俁NA的用量可從0.01 pg到2 μg之間,該試劑盒為50 μl的反應體系
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產品名稱 :

 一步法RT-PCR反轉試劑盒

品牌 :

 BIOMIGA

貨號 :

 RT0213-01

規格 :

 20次/50次/100次

詳細信息 :

 

產品簡介

 

一步法RT-PCR試劑盒是為從總RNA或mRNA中特異性的反轉和擴增目的RNA而設計的。該系統在一種優化反應體系中共用MMLV反轉錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶的預混液,能夠檢測長達4.0 kb的RNA目的片段??俁NA的用量可從0.01 pg到2 μg之間,該試劑盒為50 μl的反應體系。

 

試劑盒組分

 

產 品

RT0213-00

RT0213-01

RT0213-02

RT0213-03

Reactions

5

20

50

100

Enzyme mix: MMLV RT/ Hot start Taq Mix

5 μL

20 μL

50 μL

100 μL

2× Reaction mix (optimized bμffer contains dNTP and Mg2+

125 μL

500 μL

1.25 mL

2×1.25 mL

5 mM Magnesiμm Sμlfate

125 μL

500 μL

1.0 mL

2×1.0 mL

dd H2O

150 μL

600 μL

1.5 mL

2×1.5 mL

 

保存條件

 

該試劑盒-20°C保存,在此條件下可保存二年。

 

產品特點

 

方便的一管式設置

*的RT-PCR緩沖液及高效性

高度敏感性、特異性及重復性

 

推薦RT-PCR反應體系

 

建議用如下組成配制RT-PCR反應起始液:

組分

50 μl 體系

終濃度

2× Reaction mix

25 μL

Enzyme mix

1.0 μL

 

Forward Primer (10 μM)

1.0 μL

200 nM

Reverse Primer (10 μM)

1.0 μL

200 nM

RNA template

× μL

Variable (0.01pg - 2μg)

Final Volμme (μL)

50 μL

用dd H2O補足50 μL體系

*如有必要,鎂鹽濃度可進一步優化。

1.將反應溶液在冰上解凍。

2.按下列熱循環程序進行反應,以便cDNA合成之后立刻進行PCR擴增。

     cDNA合成: 1 cycle: 40–50°C for 10 min

      變性: 1 cycle: 94°C for 2 min

      PCR 擴增: 40 cycles:

                     94°C for 15 s

                     55-65°C for 30 s

                     68°C for 1 min/kb

3.用凝膠電泳檢測RT-PCR擴增產物。



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